<行业新闻>FcγRIIIa糖基化与抗体药ADCC

                                                                    （来源于闲谈 Immunology ，作者挑食的喵）

抗体依赖性细胞介导的细胞毒性（ADCC）是一种有效的细胞毒性机制，主要由NK细胞介导，是多种抗体药物（如利妥昔单抗、达雷妥尤单抗、曲妥珠单抗等）的效应机制基础，增强ADCC效应是抗体药物工程改造的重要方向。

CD16a/ FcγRIIIa是NK细胞上识别IgGs-Fc段的主要受体，负责触发ADCC，而且其糖基化对于ADCC至关重要。

CD16a的结构：是一种跨膜受体，具有一个较短的C-ter胞质尾巴，并具有两个细胞外IgG样结构域，细胞内部分没有任何信号成分。因此，为了转导信号，它需要两个基于免疫受体酪氨酸激活基序（ITAM）携带的信号链。

糖基化：Fc N-297-聚糖与CD16a的相互作用中起着关键作用，已经获得广泛认可。（抗体糖基化与工程改造），但关于CD16a糖基化的作用以及它如何影响与IgG的亲和力，我们知之甚少。已有研究显示CD16a在N38、N45、N74、N162和N169五处发生天冬酰胺修饰。N162N-聚糖直接影响CD16a对IgG的亲和力， N45N-聚糖不位于IgG结合位点，但它通过稳定CD16a结构，辅助CD16a与IgG的结合。CD16a 48L/H多态性靠近N45聚糖位点，调节其糖基化的组成，并可能调节CD16a的功能。

CD16a/IgG Fc相互作用：CD16a以1：1的化学计量学方式与IgG的下铰链CH2相互作用，与CH2的N297相连的Fc N-聚糖链在这种相互作用中起着关键作用。除了IgG Fc与CD16a的相互作用外，现在的数据支持Fab可能与IgG/CD16a的相互作用有关，因为Fab的突变可以调节了ADCC。尤其是在靶抗原低密度表达的情况下，抗体与抗原单价结合，此      时有一条抗体臂处于游离状态，Fab段在IgG和CD16a相互作用中起重要作用。

信号通路：NK细胞的细胞毒性是由大量的抑制性或激活性受体调节。CD16a可提供最强信号，并克服抑制信号。CD16a在脂筏中形成簇，CD16a信号发生在脂筏中，产生适当的细胞内信号。CD16a在其细胞质尾部不具有任何ITAM结构域，因此需要两个携带ITAM结构域的细胞内链CD3ζ和FcϵRIg的帮助。在CD16a结合时，一个属于Src家族的激酶Lck被激活，并磷酸化CD3ζ和/或FcϵRIg的ITAM结构域。磷酸化的ITAMs允许招募和磷酸化来自Syk家族的激酶，如Syk和ZAP-70，这些激酶反过来负责随后的信号转导。在它们的底物中，PI3K是高度相关的，因为它将PIP2转化为PIP3，由PLC-g处理，释放IP3和DAG。DAG激活了PKC家族，这有助于触发脱颗粒。IP3诱导钙从内质网释放到细胞质中。这种钙内流是ADCC触发的主要信号之一，也允许NFAT在细胞核中易位，诱导其靶基因的转录。还有其他由CD16a参与激活的参与ADCC的通路，例如ERK2 MAPK通路。

调节：在CD16a依赖的NK细胞介导的细胞毒性后，CD16a迅速下调。目前比较明确的是两个机制：机制一是金属蛋白酶ADAM17切割CD16a的Ala195和Va196之间的柄区域，导致CD16a脱落。ADAM17对CD16a的切割呈顺式发生，这意味着一个表达ADAM17的NK细胞不能诱导另一个NK细胞上的CD16a脱落。机制二是CD16a内化，这不仅发生在CD16a，也发生在其他细胞内信号成分，如CD3ζ、ZAP-70和Syk。它们通过泛素化系统进行降解。